携反义二型基质金属蛋白酶基因的重组腺病毒的构建
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY（2004）
摘要
目的构建携带反义二型基质金属蛋白酶(MMP2)基因的重组腺病毒.方法从新鲜肝癌组织中提取总RNA,用RT-PCR法合成MMP2 cDNA序列中5′端转录起始位点附近长约500 bp的基因片段,将此片段反义克隆到腺病毒载体(AdEasy)系统的多克隆位点,经转染293细胞生成携带反义MMP2基因的重组腺病毒Ad-MMP2As.结果成功构建并包装携带反义MMP2基因片段的重组腺病毒Ad-MMP2AS,病毒滴度达1×108/ml.结论构建的重组腺病毒Ad-MMP2As可望能有效地将反义MMP2基因片段导入人肝癌细胞株,为进一步研究肝癌浸润和转移机理以及探讨抑制肝癌浸润和转移的方法提供实验基础.
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