雄激素通过雄激素受体途径调控小鼠附睾Fkbp5基因的表达

目的：初步研究小鼠附睾Fkbp5（FK506 binding protein 5）基因对雄激素的响应性以及相关的分子机制。方法建立小鼠去势以及雄激素补充模型。采用RT-PCR以及RT-qPCR，检测正常小鼠、去势小鼠以及去势后补充外源雄激素的小鼠附睾中Fkbp5基因的mRNA表达水平。搜索染色体免疫共沉淀-测序（chromatin immunoprecipitation-sequencing, ChIP-seq）数据建立的小鼠附睾全基因组雄激素受体（androgen receptor, AR）结合位点的数据库，寻找与Fkbp5基因相关联的AR结合位点。利用AR抗体进行染色体免疫共沉淀（chromatin immunoprecipitation, ChIP），采用ChIP-PCR以及ChIP-qPCR的方法，检测Fkbp5基因相关联的AR结合位点在体内与AR的结合情况。结果去势后，Fkbp5基因的表达显著降低（P＜0.05）；补加雄激素后，Fkbp5基因的表达又升至正常水平（P＜0.05）。从小鼠附睾AR结合位点的数据库中鉴定到14个Fkbp5相关联的AR结合位点。ChIP-PCR结果显示，在正常生理状态下，这14个结合位点均与AR结合。ChIP-qPCR结果显示，去势后，这14个AR结合位点的富集倍数均显著下降（P＜0.05）；而补加雄激素后，这些AR结合位点的富集倍数又显著上升至生理水平（P＜0.05）。结论 Fkbp5在小鼠附睾内的表达受雄激素的正调控，并且是AR的一个直接靶基因。该研究首次证实了Fkbp5的启动子以及上游增强子区域存在雄激素响应元件，为探究雄激素/AR对Fkbp5的调控机制提供了新的视角。