MiR-494通过激活PI3K/AKT通路减轻大鼠肝缺血——再灌注损伤

目的 探讨微小核糖核酸(miRNA)-494对肝缺血-再灌注损伤(HIRI)的影响及相关作用机制.方法 24只雄性SD大鼠随机均分为4组(每组6只):假手术组行腹部手术而未行肝脏缺血-再灌注;HIRI组大鼠行部分肝缺血60 min后,再灌注6 h;HIRI+agomir-miR-494组在术前7 d内每日腹腔注射agomir-miR-494(20μL);HIRI+agomir-NC组在术前7 d内每日腹腔注射等量的agomir-NC.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组肝组织中miR-494的信使核糖核酸(mRNA)表达水平.采用相关试剂盒检测各组的肝损伤指标和氧化应激指标表达水平.观察各组肝组织病理学改变.采用试剂盒检测各组大鼠肝组织中凋亡细胞数和胞质组蛋白相关DNA片段.采用免疫印迹法检测各组凋亡相关蛋白以及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(AKT)通路相关蛋白的表达量.结果 HIRI+agomir-miR-494组大鼠肝组织miR-494的mRNA水平显著高于HIRI+agomir-NC组(P<0.01).HIRI+agomir-miR-494组的血清肝损伤指标以及血清氧化应激指标均显著低于HIRI+agomir-NC组(均为P<0.01).与HIRI+agomir-NC组相比,HIRI+agomir-miR-494组肝细胞坏死明显减少和细胞完整性提高(P<0.05),TUNEL阳性细胞数量明显减少(P<0.05).HIRI+agomir-miR-494组的cleaved-多聚二磷腺苷核糖聚合酶(PARP)、cleaved-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、Bax水平明显低于HIRI+agomir-NC组(均为P<0.05).HIRI+agomir-miR-494组大鼠DNA片段显著少于HIRI+agomir-NC组(P<0.01).HIRI+agomir-miR-494组大鼠肝脏p-AKT、p-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-p70S6K表达量明显高于HIRI+agomir-NC组(均为P<0.05).结论 miR-494可以减轻大鼠HIRI,其作用机制与激活PI3K/AKT信号通路有关.