miR-204通过Wnt信号通路对骨质疏松症小鼠成骨细胞增殖的影响及机制分析

目的:探讨miR-204通过Wnt信号通路对骨质疏松症小鼠成骨细胞增殖的影响及机制分析。方法:雌性昆明小鼠分为：对照组、假手术组和骨质疏松症组，采用双侧卵巢切除法建立去卵巢骨质疏松小鼠模型并进行鉴定；提取小鼠原代成骨细胞并鉴定；细胞转染并检测miR-204的表达水平；MTT检测各组细胞活力；各组细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的检测；Transwell检测各组细胞的侵袭能力；细胞流式术检测各组细胞凋亡情况；细胞流式术检测各组细胞Caspase-3活性；双荧光素酶报告基因检测miR-204和 β-catenin、LRP-5间的相互作用；Western blot检测Wnt信号通路相关蛋白表达情况。 结果:骨质疏松症组小鼠骨密度较对照组和假手术组明显降低（ P=0.007， P=0.057），表明骨质疏松症小鼠造模成功。miR-204的表达水平在miR-204模拟物组明显提高（ P=0.072），在miR-204抑制剂组下降（ P=0.031）；miR-204模拟物组成骨细胞活力和ALP活性提高（ P=0.007， P=0.043），miR-204抑制剂组成骨细胞活力和ALP活性下降（ P=0.007， P=0.035）；miR-204模拟物组成骨细胞的侵袭能力明显增强（ P=0.006），miR-204抑制剂组成骨细胞的侵袭能力下降（ P=0.036）；miR-204模拟物组成骨细胞的凋亡能力和Caspase-3活性下降（ P=0.041， P=0.045），miR-204抑制剂组成骨细胞的凋亡能力和Caspase-3活性增强（ P=0.005， P=0.039）；miR-204与 β-catenin、LRP-5之间有靶向关系；miR-204模拟物组成骨细胞中 β-catenin和LRP-5蛋白表达均上调（ P=0.043， P=0.009），miR-204抑制剂组成骨细胞中 β-catenin和LRP-5蛋白表达均下调（ P=0.041， P=0.032）。 结论:miR-204可能促进成骨细胞的增殖，激活Wnt信号通路，对骨质疏松症有一定的保护作用。