RNA干扰下调FoxM1基因表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨RNA干扰下调叉头转录因子M1 (Forkhead box protein M1,FoxM1)基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及分子机制.方法 设计合成3个FoxM1 siRNA,转染人胰腺癌Panc-1细胞后采用定量PCR方法筛选下调FoxM1 mRNA效果最好的siRNA;然后以该siRNA转染Panc-1细胞后,分别以实时定量PCR检测各组细胞FoxM1 mRNA表达情况;以不同浓度siRNA转染胰腺癌细胞后,分别以MTT法检测吉西他滨(20 nM,Gemcitabine)对各组细胞生长和化疗敏感性的影响;以蛋白质印迹方法检测Akt磷酸化情况.结果 3个siRNA均明显下调FoxM1 mRNA水平,以S3效果最好.MTT结果显示,Con-A+ Gem组、Con-B+ Gem组、siRNA(3.125nM)+GemsiRNA、siRNA(6.25nM)+ Gem、siRNA(12.5nM)+Gem组抑制率分别为17.78％、17.56％、35.39％、52.81％及70.98％.蛋白质印迹检测发现,siRNA转染组Akt磷酸化水平明显下调.结论 FoxM1基因siRNA可促进胰腺癌细胞化疗敏感性,通过下调Akt磷酸化水平可能是其重要机制之一,但其内在的分子机制尚需进一步探讨.