脑胶质瘤Wip1基因与DNA损伤修复关系的研究

目的 研究U251脑胶质瘤细胞Wip1基因对DNA核苷酸切除修复酶XPA、XPC的影响.方法 体外培养人胶质瘤细胞株U251,wip1(-)组采用携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒沉默Wip1基因,经实时定量PCR验证.对照组(NC组)采用阴性对照病毒感染.使用替莫唑胺(temozolomide,TMZ)进行干预,将细胞分为NC组、NC+TMZ组、Wip1(-)组和wip1 (-)+TMZ组.CCK-8法检测各组细胞的增殖,实时定量PCR检测细胞XPA、XPC mRNA表达,免疫印迹检测细胞XPA、XPC蛋白表达.结果 TMZ干预后48 h、72 h、96 h、120h、144h,Wip1 (-)+TMZ组细胞增殖率低于其他3组(P＜0.05).TMZ干预48 h后,NC+TMZ组细胞XP和XPC mRNA表达远远高于NC组(P＜0.05),同时XPA和XPC蛋白表达远远高于NC组(P＜0.05).TMZ干预48 h后,Wip1(-)+TMZ组细胞XPC mRNA和XPA蛋白表达水平明显高于Wip1(-)组(P＜0.05).结论 Wip1基因与U251脑胶质瘤细胞DNA损伤修复有关,可通过调节下游产物XPA与XPC参与细胞核苷酸切除修复过程.