再程序化脂肪源性干细胞的制备及体外定向分化为神经元的实验研究

[目的]制备再程序化脂肪源性干细胞以及探索诱导其定向分化为神经元的[方法].[方法]体外培养脂肪来源干细胞(ADSCs),取纯化、鉴定过的第3代ADSCs接种于24孔板中并分A,B,C三组:A组为带有绿色荧光基因(GFP)的慢病毒载体介导Neurogenin2(Ngn2)基因转染的ADSCs,制备再程序化脂肪干细胞；B组为带有GFP的空载体病毒转染的ADSCs；C组为未进行慢病毒介导基因转染的ADSCs；转基因7d后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15d.光镜下观察各组细胞形态变化以及免疫荧光研究各组ADSCs诱导后定向分化为神经元的差异.[结果]与B组和C组相比,A组ADSCs转基因后再经诱导分化15d后绝大部分细胞类似神经元,胞体呈梭形或椭圆形,有两个或三个突起伸出,细胞表达神经丝蛋白NF、神经元特异性蛋白NeuN及神经元特异性烯醇化酯酶NSE比例大大提高.B组与C组的神经元分化效率,无显著差异,P＞0.05.[结论]慢病毒介导Neurogenin2基因体外转染ADSCs可以制备出再程序化脂肪源性干细胞,诱导后具有更强的定向分化为神经元的能力.