脂多糖对肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1及整合素β3表达的调控并抑制自噬的研究

目的 明确脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1(thymocyte differentiation antigen-1,Thy-1)和整合素β3蛋白表达的调控作用,并观察其与肺成纤维细胞自噬抑制的关系. 方法 将原代培养的小鼠肺成纤维细胞采用随机数字法分为4组(每组3孔):PBS对照组(Con组)、0.25 mg/L LPS组(LPS0.25组)、0.50 mg/L LPS组(LPS0.50组)、1.00 mg/L LPS组(LPS1.00组),随后以不同浓度LPS(0.25、0.50、1.00 mg/L)刺激,于刺激后6h通过Western blot检测不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞后Thy-1和整合素β3蛋白的表达情况.于刺激后30 h比较肺成纤维细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的表达情况,同时通过透射电子显微镜观察细胞内自噬小体形成情况. 结果 随着LPS刺激浓度的增加,小鼠肺成纤维细胞的Thy-1蛋白表达量下降,其中LPS100组较Con组有明显下降(P＜0.05);整合素β3蛋白表达量升高,其中LPS100组较Con组有明显升高(P＜0.05).LPS1.00组刺激小鼠肺成纤维细胞30 h后明显抑制其自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的表达(P＜0.05),并抑制自噬小体形成(P＜0.05). 结论 LPS可下调Thy-1蛋白表达、上调整合素β3蛋白表达,同时抑制自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的表达及自噬小体的生成,该过程可能与LPS诱导肺成纤维细胞自噬抑制以及肺纤维化进展有关.