白藜芦醇对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用

目的 探讨白藜芦醇(Res)预处理对脑缺血再灌注大鼠神经功能损伤的作用及其机制.方法 将80只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Res组、Res+PI3K抑制剂组,每组20只.以线栓法建立大脑中动脉阻塞后缺血再灌注模型.造模前6d,Res组和Res+PI3K抑制剂组腹腔注射Res(15 μg/g,1次/d),假手术组和模型组腹腔注射等体积生理盐水;造模前30 min,Res组和Res+PI3K抑制剂组先腹腔注射Res(15 μg/g),然后,Res+PI3K组用微量注射器向右侧脑室注射PI3K抑制剂3-MA 5μl(50 μg),假手术组和模型组右侧脑室注射等体积生理盐水.造模后24h处死大鼠采用TTC染色法评估大鼠脑梗死面积,取材前行神经功能评分;以尼氏染色以及透射电镜观察神经细胞尼氏体和白噬体数量;通过Q-PCR法检测脑组织自噬基因mRNA水平,免疫印迹法检测脑组织PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白及磷酸化表达水平.结果 与假手术组相比,模型组神经功能评分明显增高(P＜0.05),脑梗死体积明显增大(P＜0.05),损伤脑组织尼氏体明显减少(P＜0.05),自噬相关基因Beclin1 mRNA水平明显升高(P＜0.05),PI3K、mTOR和Akt蛋白表达水平无显著变化(P＞0.05),而各自蛋白磷酸化水平均显著降低(P＜0.05).相比于模型组,Res组上述变化明显改善(P＜0.05),而PI3K抑制剂明显抑制Res的作用(P＜0.05).结论 Res能有效减轻缺血再灌注模型大鼠脑组织造成的神经功能损伤,可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路促进细胞白噬有关.