泛素特异性蛋白酶15对结肠癌细胞上皮间质转化的影响

目的:研究泛素特异性蛋白酶15(ubiquitin specific peptidase 15,USP15)对结肠癌HCT116细胞上皮间质转化的影响.方法:TGF-β1可诱导结肠癌细胞发生上皮间质转化.采用TGF-β1处理HCT116细胞,同时采用人USP15特异性小干扰RNA (TGF-β1+siUSP15)转染HCT116细胞,阴性对照序列(TGF-β1+siScramble)作为对照.采用siUSP15转染结肠癌奥沙利铂耐药细胞株(HCT 116/L-OHP),然后采用奥沙利铂处理48 h.阴性对照序列(siScramble)作为对照,实时荧光定量聚合酶链反应检测USP15、E钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达.Western印迹检测USP15、E-钙黏蛋白、波形蛋白的蛋白表达.细胞划痕实验检测HCT116的迁移能力.CCK8法检测细胞抑制率.结果:siUSP15能有效抑制USP15在HCT116中的表达.与TGF-β1+siScramble组相比,TGF-β1+siUSP15组细胞中E钙黏蛋白表达上调(P＜0.05),而波形蛋白表达下降(P＜0.05).细胞划痕实验显示,与TGF-β1+siScramble组相比,TGF-β1+siUSP15细胞的迁移能力显著下降(P＜0.05).CCK8检测结果显示,USP15的表达下调能增加HCT116/L-OHP对奥沙利铂的敏感性(P＜0.05).结论:USP15在结肠癌细胞上皮间质转化过程中发挥重要作用.