低浓度过氧化氢预处理骨髓间充质干细胞对创面愈合的促进作用

目的:观察低浓度过氧化氢(H2O2)预处理骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植到大鼠组织缺损创面后BMSCs在创面的存活情况及其对创面的促愈合作用.方法:75只SD大鼠,于背部中线靠颈侧制备直径1 cm的圆形全层皮肤缺损.按随机数字表法分为3组(每组25只):生理盐水组、单纯BMSCs组和H2O2预处理BMSCs组.在伤后即刻,分别经尾静脉注射等体积(0.5 ml)的生理盐水、CM-Dil标记的BMSCs悬液或50 u mol/L H2O2预处理12 h并经CM-Dil标记的BMSCs.伤后0～15d创面拍照,用Image Proplus 5.0图像分析软件分析图像,计算创面愈合率;伤后1、2、5d荧光显微镜下观察两BMSCs组创面BMSCs的数量;CD31免疫组化染色观察创面微血管密度的变化.结果:①创面干细胞数量:移植H2O2预处理的BMSCs后,创面干细胞数量明显多于单纯BMSCs移植组(P＜0.05和P＜0.01).与伤后第1天比较,单纯BMSCs组伤后第2天和第5天创面干细胞数量显著减少(P＜0.05);而预处理组创面干细胞数量虽然也呈进行性减少,但3个时相点创面的干细胞数量差异没有显著性(P＞0.05).②创面愈合率:创伤后5～15d,单纯BMSCs组和H2O2预处理BMSCs组创面愈合率均明显高于生理盐水组(P＜0.05或P＜0.01);创伤后5～10d,H2O2预处理组创面愈合率明显高于单纯BMSCs组(P＜0.05).⑧创面微血管数量:CD31免疫组化结果显示,伤后3d,两BMSCs治疗组之间血管数量差异无显著性;伤后5、7、10 d,H2O2预处理组创面微血管数量显著多于单纯BMSCs组(P＜0.05).结论:BMSCs经低浓度H2O2预处理再移植到创面,可以延长移植干细胞在创面的存活时间,并具有更好的促进创面愈合和血管生成的修复潜能.