膜联蛋白A10在结直肠癌组织的表达及其与肿瘤生长转移的关系

目的:探讨结直肠癌组织中膜联蛋白A10(ANXA10)与肿瘤生长转移的关系。方法:选取唐山市工人医院肿瘤外科在2018年1月至2019年10月手术切除的结直肠腺癌标本进行研究，患者均为初诊患者。75例结直肠癌患者中男45例，女30例，年龄(57.69±8.32)岁。免疫组织化学技术(IHC)检测75例结直肠癌肿瘤及癌旁正常肠黏膜石蜡组织中ANXA10蛋白表达，分析ANXA10与患者临床病理特征的关系。应用全基因克隆技术上调人结直肠癌细胞株SW480中ANXA10的水平；新型四唑化合物(MTS)法检测细胞活性，划痕实验及Transwell小室实验检测肿瘤细胞迁移及侵袭能力。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)技术检测肿瘤细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、N-钙黏素(N-cadherin)、E-钙黏素(E-cadherin)的表达。应用SPSS 21.0软件对数据采用 t检验、单因素方差分析。 结果:结直肠癌组织中ANXA10蛋白阳性率(22.67%)低于癌旁正常肠黏膜(54.67%， χ2＝16.190， P<0.01)；ANXA10表达与患者的肿瘤分化(高中分化36.36%，低未分化11.90%)、淋巴结转移(阳性5.13%，阴性41.67%)及临床分期(Ⅰ～Ⅱ期58.33%，Ⅲ～Ⅳ期5.88%)明显相关( χ2＝6.307， P<0.05， χ2＝14.258， P<0.01， χ2＝25.614， P<0.01)。ANXA10在人结直肠癌细胞株中低于正常肠黏膜细胞株HIEC，SW480细胞中ANXA10表达最低( F＝31.714、85.211， P<0.01)。转染后SW480细胞中ANXA10表达明显增高( F＝1 774.586、1 559.994， P<0.01)；转染48 h后转染组SW480细胞的活性明显低于对照组( F＝271.017、215.699， P<0.01)；转染组SW480细胞的迁移能力、侵袭能力明显低于对照组( F＝1 204.876、70.137， P<0.01)。转染组SW480细胞中PCNA、N-cadherin、MMP-2的mRNA和蛋白水平均明显低于对照组(mRNA： F＝35.974， P<0.01； F＝8.933， P<0.05； F＝21.868， P<0.01；蛋白： F＝100.484， P<0.01； F＝90.413， P<0.01； F＝7.990， P<0.05)；而E-cadherin的mRNA和蛋白水平在转染组明显高于对照组(mRNA： F＝40.375， P<0.01；蛋白： F＝128.487， P<0.01)。 结论:结直肠癌组织存在ANXA10表达缺失现象，ANXA10表达下调可能是导致结直肠癌进展及转移的重要机制。