长链非编码RNA FOXD2-AS1在骨肉瘤中的表达及对骨肉瘤的作用及机制

目的:研究长链非编码RNA(lncRNA) FOXD2-AS1在骨肉瘤组织及细胞株中的表达及对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用与机制。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测36例骨肉瘤组织与癌旁组织中FOXD2-AS1的表达量并分析其表达与临床特征的关系。检测FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株(MG63，Saos-2，U2-OS，143B)和人成骨细胞株(hFOB1.19)的表达，并选取两种高表达的细胞株敲降其表达，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)流式细胞术、Transwell实验检测增殖、凋亡、侵袭和迁移，并通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)、蛋白质印迹法(Western blot)和ChIP检测FOXD2-AS1对EZH2和p21的影响。结果:FOXD2-AS1在骨肉瘤组织中的表达高于癌旁组织( t＝17.900， P<0.01)；并且在体积大、TNM分期高的骨肉瘤组织中表达量更显著( χ2＝4.208、9.257， P<0.01)。FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株中的表达量均高于人成骨细胞株( t＝14.540、9.970、5.890， P<0.01)，尤其是在MG63和Saos-2细胞株中，敲降FOXD2-AS1的表达能够抑制增殖( P<0.05)、促进凋亡( P<0.01)和抑制侵袭和迁移( P<0.01)。RNA-IP、Western blot和ChIP结果显示FOXD2-AS1与EZH2互作，敲降FOXD2-AS1降低了EZH2和H3K27me3与p21启动子区的分子结合。 结论:FOXD2-AS1能够提示临床预后不良，促进骨肉瘤细胞的恶性生物学行为，其机制可能是通过与EZH2互作，从而抑制p21的表达实现的。