微小RNA-106b通过调控核因子-κB受体活化因子配体/骨保护素对胶原诱导的小鼠关节炎骨质破坏的作用

目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-106b对胶原诱导的小鼠关节炎(CIA)骨关节破坏的影响.方法 实验分为4组:对照组(Sham组),慢病毒载体组(NC组),miR-106b mimic组(Mimic组)和miR-106b inhibitor组(Inhibitor组).采用牛Ⅱ型胶原免疫DBA/1小鼠建立CIA模型.显微CT (Micro-CT)检查评估骨组织破坏程度,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟破骨细胞;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CIA小鼠膝关节中miR-106b的表达;酶联免疫吸附(ELISA)检测外周血中核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)的表达变化.应用SPSS 11.0统计软件分析,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,多样本间比较采用单因素方差分析,组间比较采用Tukey post-hoc pairwise分析,统计运算前所有数据均进行方差齐性检验.结果 RT-PCR结果显示miR-106b在CIA小鼠膝关节中高表达.Micro-CT结果显示,降低miR-106b表达后,CIA小鼠骨关节破坏明显减轻;骨体积、骨体积分数、骨面积分数、骨小梁厚度分别为(6.85±0.24) mm3、(22.52±0.62)％、(9.46±2.02)/mm、(0.31±0.06) mm,与NC组[(5.61±0.35) mm3、(16.26±1.42)％、(13.32±1.85)/mm、(0.24±0.06) mm]比较,差异有统计学意义(P＜0.01).TRAP染色结果显示CIA小鼠关节破坏局部有大片紫红色深染区域,Inhibitor组仅可见少量阳性染色区域,提示miR-106b inhibitor能够抑制破骨细胞活化.ELISA结果显示,miR-106b inhibitor能促进OPG的分泌,抑制RANKL的表达,使RANKL/OPG比值明显降低.结论 抑制miR-106b能减轻CIA模型小鼠骨关节破坏.