磷酸化糖原合成酶激酶-3β在小剂量衣霉素减轻心肌缺血再灌注损伤中的作用
Chinese Journal of Experimental Surgery(2017)
Abstract
目的 观察磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)在小剂量衣霉素减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)中的作用.方法 将40只成年雄性SD大鼠,使用数字表法随机分为假手术组(Sham组)、I/R组、I/R+衣霉素组(TM组)及I/R+ TM+ LY294002组(TM+ LY组),每组各10只.通过结扎左冠状动脉前降支并再灌注的方法建立I/R模型,TM组、TM+ LY组在模型建立前30 min腹腔注射TM 0.6 mg/kg,TM+ LY组同时使用p-GSK-3β的上游信号分子蛋白激酶B(Akt)的抑制剂LY294002(10 mg/kg).分别于开胸后和再灌注2h取颈动脉血,比色法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)活性.再灌注2h后处死大鼠摘取心脏,原位缺口末端标记法(TUNEL)观察心肌细胞凋亡,Western blot检测心肌磷酸化Akt (p-Akt)及p-GSK-3β3蛋白的表达.结果 再灌注2h时TM+ LY组CK-MB、LDH水平较TM组高[(987±103) U/L比(746±99) U/L,t =2.945,P-0.006;(4 761 ±636) U/L比(3681 ±518) U/L,t=2.789,P=0.008].TM+ LY组凋亡指数较TM组高,差异有统计学意义[(18.7±2.9)%比(14.4±2.8)%,=2.864,P=0.007].再灌注2h心肌p-Akt及p-GSK-3β蛋白表达:TM组:0.613±0.068、0.717±0.086、TM+LY组:0.364±0.046、0.452±0.053、I/R组:0.251±0.032、0.232±0.031;TM+ LY组表达低于TM组,差异有统计学意义(两组间p-Akt比较:t=2.925,P =0.006;p-GSK-3β比较:t=2.858,P =0.007).结论 小剂量的衣霉素诱导内质网应激预处理对缺血再灌注心肌的保护作用可能与内质网应激预处理通过Akt-GSK3-β途径提高p-GSK-3β水平使GSK-3β活性得到部分抑制有关.
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Key words
Myocardial ischemia reperfusion injury,Endoplasmic reticulum stress,Preconditioning,Glycogen synthase kinase-3β
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