激光扫描共聚焦显微镜观察瘦素在小鼠日本血吸虫病肝纤维化中的作用

目的 观察小鼠感染日本血吸虫后不同时期肝脏瘦素长受体(OB-Rb)蛋白动态表达,探讨瘦素在日本血吸虫病肝纤维化发生发展中的作用及意义.方法 日本血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染小鼠构建日本血吸虫病肝纤维化模型,于感染后不同时间取肝脏标本.苏木素-伊红(HE)和Van Gieson(VG)染色对肝组织进行病理学检查,免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法动态观察OB-Rb及肝星状细胞(HSC)标志物α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)联合免疫荧光双重标记技术进一步观察肝纤维化组织和虫卵OB-Rb和α-SMA蛋白表达.结果 α-SMA和OB-Rb阳性表达出现的时间、部位和进程类似,随病程发展呈进行性加重,两者共表达于肝纤维化胶原纤维沉积处.结论 HSC是日本血吸虫病肝纤维化发生发展过程中的关键细胞,瘦素在该过程中发挥重要的促肝纤维化作用,可望成为新的治疗靶点.联合应用LSCM和免疫荧光双重标记技术能对蛋白进行精确的定位研究.