缺氧诱导因子-1α-诱导型一氧化氮合酶-一氧化氮信号通路在肺缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α-诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-一氧化氮(NO)信号通路在肺缺血再灌注损伤(LIRI)中的作用及其机制.方法 选择200 ～ 250 g的健康雄性SD大鼠40只,随机分为5组(n=8):假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血再灌注加二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)处理组(DMOG组)、缺血再灌注加诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂1 400W处理组(1 400W组)、缺血再灌注加DMOG和1400W处理组(DW组).C组:仅行左侧开胸,不行缺血再灌注处理;I/R组:建立大鼠LIRI模型,夹闭左侧肺门,阻断60 min后,再灌注120 min;DMOG组和DW组:在动物模型建立前24 h腹腔注射DMOG 40 mg/kg;1 400 W组和DW组在实验开始麻醉后即刻腹腔注射1 400 W 5 mg/kg.实验结束后,留取各组大鼠左肺组织标本.严格按照试剂盒操作步骤检测肺组织HIF-1 α蛋白表达,iNOS、eNOS和SOD活性,NO、丙二醛(MDA)和白细胞介素(IL)-8含量;计算肺组织湿/干重之比(W/D).结果 (1)与C组比较,I/R、DMOG、1 400W和DW组HIF-1α蛋白表达(154.61 ±6.56、138.23±10.81、151.68 ±9.65、136.35±5.78比178.72 ±8.34)增加,eNOS活性[(0.35±0.09)、(0.32 ±0.10)、(0.50 ±0.13)、(0.49±0.15)比(0.58 ±0.12) U/mg·蛋白]降低;I/R组和DMOG组iNOS活性[(0.91±0.27)、(1.15 ±0.32)比(0.41±0.13) U/mg·蛋白]和NO含量[(0.87 ±0.18)、(1.03 ±0.16)比(0.44 ±0.09)μmol/L]增加(P＜0.05).(2)与I/R组比较,DMOG组和DW组HIF-1α蛋白表达(138.23±10.81、136.35±5.78比154.61 ±6.56)增加;1400W组和DW组iNOS活性[(0.39 ±0.11)、(0.42 ±0.12)比(0.91±0.27) U/mg·蛋白]和NO含量[(0.41 ±0.11)、(0.40 ±0.08)比(0.87 ±0.18) μmol/L]降低,eNOS活性[(0.50±0.13)、(0.49 ±0.15)比(0.35 ±0.09) U/mg·蛋白]增加(P＜0.05).结论 HIF-1α-iNOS-NO信号通路参与了LIRI的过程,其可能机制是:缺血再灌注上调HIF-1α蛋白的表达,通过iNOS/NO通路引起肺组织损伤.