微小RNA-449a靶向B细胞淋巴瘤/白血病-2抑制神经母细胞瘤细胞增殖

目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-449a对神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH增殖的影响并探讨其作用机制.方法 人工设计合成miR-449a模拟物,构建上调miR-449a表达的细胞株SK-N-SH;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染后miR-449a的表达水平;转染48 h后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞24、48、72 h的增殖,膜联蛋白V(Annexin-V)/碘化丙锭(PI)法检测细胞凋亡;利用生物信息学方法预测miR-449a的候选靶基因.结果 转染miR-449amimic的细胞中miR-449a的表达水平升高3.5倍;过表达miR-449a后细胞生长速度较对照组细胞明显减慢;过表达miR-449a后细胞凋亡明显增加,细胞总凋亡比例为(21.94±3.37)％,而对照组细胞的总凋亡比例为(11.01±3.51)％,两者差异有统计学意义(P＜0.05);通过靶基因预测软件分析,抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病2(bcl-2)是miR-449a的靶基因,过表达miR-449amimic后,内源性bcl-2蛋白的表达水平显著下降.结论 miR-449a可能通过调控bcl-2的转录水平抑制神经母细胞瘤细胞增殖,促进凋亡.