受体酪氨酸激酶通过磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B-p21激活激酶-1通路对肝癌细胞转移的调控

目的 观察受体酪氨酸激酶(Axl)在肝癌细胞转移过程中的作用及其对磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)-p21激活激酶-1(PAK1)信号通路的调控作用.方法 体外培养肝癌细胞株MHCC97-H和MHCC97-L细胞.运用Western blot方法研究Axl在肝癌细胞MHCC97-H和MHCC97-L细胞株中的蛋白表达水平.通过短发夹RNA(shRNA)转染肝癌细胞MHCC97-H细胞株抑制Axl的表达,探究Axl对PI3 K/Akt-PAK1信号通路的调控作用机制,并分析Axl蛋白表达与肝癌细胞侵袭与转移的关系.结果 与MHCC97-L细胞株比较,Axl在MHCC97-H细胞株中具有更高的表达水平.MHCC97-H细胞中Axl表达下调降低了PI3K、Akt、PAK1信号通路分子的磷酸化水平,并明显抑制了肝癌细胞的侵袭性;侵袭实验结果示:Axl-短发卡RNA(shRNA)转染组穿过基质胶的细胞数为(23±3)个,较质控组的(37±5)个和正常细胞MHCC97-H组的(38±5)个明显减少(P＜0.05).用PI3K特异性抑制剂LY294002或Akt-小干扰RNA (siRNA)阻断PI3K/Akt信号通路明显抑制PAK1的激活及细胞的侵袭性;侵袭实验结果显示:Akt-siRNA转染组和PI3K特异性性抑制剂LY294002抑制组穿过基质胶的细胞数为(23±3)、(18±3)个,较质控组的(37±5)个,二甲基亚砜(DMSO)组的(38±5)个明显减少(P＜0.05).结论 Axl能够通过PI3 K/Akt-PAK1调节肝癌细胞的转移过程.