不同免疫抑制剂经核因子-κB信号途径调节肠上皮细胞防御素的表达
Chinese Journal of Experimental Surgery(2013)
摘要
目的 探讨4种不同免疫抑制剂(他克莫司、环孢素A、雷帕霉素、雷公藤多甙)对Caco-2和HT-29细胞人β防御索1和2(hRD-1/2)的表达影响及机制.方法 通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测终质量浓度为10 μmol/L的4种不同免疫抑制剂对白细胞介素-1β(IL-1β,20μg/L)诱导的人肠上皮细胞hBD-1/2表达的影响,应用凝胶电泳迁移率实验法(EMSA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Caco-2细胞核子-κB(NF-κB)的表达.结果 肠上皮细胞组成性表达hBD-1;他克莫司、环孢素A和雷帕霉素组在Caco-2细胞中hBD-2 mRNA促进率分别为(20.58±1.02)%、(139.49±6.97)%和(425.97 ±21.29)%,雷公藤多甙组hBD-2 mRNA抑制率为(48.59±2.42)% (P<0.05).HT-29细胞中上述指标分别为(62.52±3.25)%、(20.56±1.10)%、(46.79±2.28)%和(82.73±7.88)%(p<0,05).Caco-2细胞中hBD-2蛋白的表达与mRNA的表达趋势一致.EMSA和ELISA检测活化的NF-κB显示他克莫司、环孢素A和雷帕霉素组促进NF-κB的活化,雷公滕多甙组抑制NF-κB的活化.并与Ser276磷酸化有关.结论 他克莫司、环孢素A和雷帕霉素促进人肠系细胞在IL-1β3诱导下表达hBD-2,雷公藤多甙抑制hBD-2的表达.其机制与NF-κB信号途径有关.
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关键词
Intestinal epithelial cells,Defensin,Immunosuppressant,Nuclear factor-κB
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