间断灌注保存对离体猪心冠状动脉保护效果的观察

目的分析间断灌注保存中灌注容量对离体猪心冠状动脉血管舒缩因子和炎性介质的影响，探寻最佳的移植供心血管保存方法。方法以巴拿马小香猪为对象，每组6头。根据保存技术不同分为浸泡保存组和灌注保存组（每隔2 h 间断灌注一次，灌注容量分别为50、100、150、200、250 ml）。灌注液为30μmol ／L二氮嗪强化 Celsior 液，保存温度为4℃，时间10 h。通过免疫组化和 RT-PCR 方法分别从蛋白水平和基因分子水平上比较各组间冠状动脉血管中内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）、内皮素1（ET-1）、细胞黏附分子1（ICAM-1）、血管性血友病因子（vWF）表达情况和电镜血管超微结构。结果 eNOS 蛋白和 mRNA表达在浸泡保存组最低，灌注保存组中随着灌注容量的增多而增高；ET-1、ICAM-1、vWF 蛋白和 mRNA 表达在浸泡保存组最高，灌注保存组中随着灌注容量的增多而降低；其中200 ml 灌注组和250 ml 灌注组各指标除 ICAM-1蛋白外免疫组化测定值差异均无统计学意义；电镜超微结构上均较好地保留内皮细胞相对完整的覆盖以及较少的空泡出现，且内皮下层较厚。结论在长时间心脏保存中，间断灌注保存能更好地保护冠状动脉血管舒缩因子，减少血管炎性介质的释放，内皮结构保存较完整；提示间断灌注保存技术对冠状动脉血管的保护作用优于单纯低温浸泡保存技术；且间断2 h 灌注一次，每次灌注容量为200 ml 的间断灌注保存技术较优越。