TUFT1在卵巢上皮性癌组织中的表达及对卵巢上皮性癌SKOV3细胞生物学功能的影响

目的:研究釉丛蛋白1（TUFT1）在卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中的表达及其对卵巢癌SKOV3细胞生物学功能的影响。方法:（1）收集郑州大学第二附属医院妇产科2009—2014年收治的卵巢癌患者114例，以同期因子宫良性疾病同时切除正常卵巢的患者30例作为对照，免疫组化SP法检测卵巢癌及正常卵巢组织中TUFT1蛋白的表达，分析不同临床病理特征的卵巢癌组织中TUFT1蛋白表达的差异，并采用Kaplan-Meier法分析TUFT1蛋白阳性、阴性患者的预后。（2）逆转录（RT）-PCR技术检测卵巢癌细胞系SKOV3细胞中TUFT1 mRNA的表达，慢病毒转染SKOV3细胞，实验分为转染组和阴性对照组，采用活细胞计数法（CCK-8法）、流式细胞仪、细胞克隆形成实验分别检测转染后两组SKOV3细胞的增殖、凋亡、克隆能力及细胞周期比例的差异。结果:（1）卵巢癌组织中TUFT1蛋白的阳性表达率为74.6%（85/114），正常卵巢组织为26.7%（8/30），两者比较，差异有统计学意义（χ 2=23.818， P=0.000）。TUFT1蛋白的表达与卵巢癌的病理分级、手术病理分期、淋巴结转移显著相关（ P<0.05）；TUFT1蛋白阳性表达患者的5年生存率（38.8%）显著低于TUFTl蛋白阴性表达者（69.0%；χ 2=11.064， P=0.001）。（2）RT-PCR技术检测显示，转染组SKOV3细胞中TUFT1 mRNA的表达水平为0.26±0.07，阴性对照组为1.17±0.15，两组比较，差异有统计学意义（ t=-9.447， P=0.001）。CCK-8法检测显示，转染后分别培养24、48、72 h后，转染组和阴性对照组细胞的 A值分别比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）。流式细胞仪检测显示，转染组细胞的凋亡率为（26.8±3.4）%，阴性对照组为（12.9±2.7）%，两组比较，差异有统计学意义（ t=5.532， P=0.005）；与阴性对照组比较，转染组细胞的G 0/G 1期比例显著增高，S期比例显著下降，分别比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）。细胞克隆形成实验显示，转染组细胞的克隆数为（16.0±2.6）个，阴性对照组为（108.0±11.4）个，两组比较，差异有统计学意义（ t=-13.664， P=0.000）。 结论:TUFT1蛋白在卵巢癌组织中高表达，TUFT1阳性患者的生存率低；TUFT1能够促进卵巢癌细胞增殖、克隆的形成，抑制卵巢癌细胞的凋亡，并影响卵巢癌细胞的细胞周期比例。