RKIP基因与卵巢上皮性癌转移的关系

目的 探讨一种新的转移抑制基因--RKIP基因与卵巢癌转移的关系.方法 应用免疫组化、RT-PCR及蛋白印迹法对卵巢肿瘤的组织标本(卵巢癌组织22份,卵巢交界性肿瘤组织8份,卵巢良性肿瘤组织10份)及卵巢癌细胞系中RKIP基因的表达情况进行检测.将含正义和反义RKIP cDNA的表达载体导入卵巢癌细胞系SKOV3,蛋白印迹法榆测转染前后细胞中丝裂原激活的蛋白激酶/细胞外信号调节激酶的激酶(MEK)、细胞外信号调节激酶(ERK)活性的,变化.应用叫甲基偶氮唑蓝法、双层软琼脂集落形成实验、体外黏附实验、体外侵袭实验、流式细胞仪等观察RKIP基因对卵巢癌细胞生物学行为的影响.结果 (1)22份卵巢癌组织中RKIP的表达以阴性(6份,27%)、弱阳性(9份,41%)为主,而10份卵巢良性肿瘤和8份交界性肿瘤组织以强阳性(分别为4份、2份)、阳性(分别为4份、5份)为主.(2)RKlP基因转染后,含正义cDNA的ssRKIP细胞的磷酸化MEK和磷酸化ERK蛋白表达水平下调,ssRKIP#1和ssRKIP#4细胞磷酸化MEK蛋白的相埘表达含量分别为0.35和0.34,两者磷酸化ERK蛋白的相对表达含最分别为0.48和0.46.(3)ssRKIP细胞的增殖能力明显低于未转染细胞(P＜0.01).(4)锚定非依赖性生长能力:ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的集落形成数(83.7±5.7、106.0±9.2)较其对照空载体pcDNA3.1(+)转染细胞(158.3±14.6)明显减少,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(5)体外黏附能力:ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的黏附率[分别为(68.3±0.8)%、(64.1±0.9)%]明显低于未转染细胞[(100.0±1.1)%],分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(6)体外侵袭能力:ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的穿膜细胞数[分别为(24±5)、(25±4)个]明显低于未转染细胞[(68±5)个],分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(7)ssRKIP细胞呈G1期细胞比例增加和G2+S期细胞比例下降.结论 RKIP基因不仅对卵巢癌细胞的侵袭、转移有抑制作用,且对其生长也有抑制作用.