沉默IGF-1R表达对子宫内膜癌化疗敏感性的影响及其相关机制研究

目的:将慢病毒载体表达的靶向IGF-1R的干扰片段转染子宫内膜癌细胞HEC-1B,探讨转染前后HEC-1B对顺铂化疗敏感性的改变及可能的潜在机制.方法:构建IGF-1R基因RNAi慢病毒载体,转染HEC-1B细胞并检测转染效率,Real-time PCR及Western blot检测转染前后IGF-1R基因及相关蛋白的表达情况,采用MTT及流式细胞仪分析转染前后细胞增殖率及凋亡的改变.结果:慢病毒载体的转染效率高达78％,转染特异IGF-1R siRNA使内源性IGF-1R mRNA降低85％(P＜0.05),蛋白降低91.4％(P＜0.05)；Akt及Erk的磷酸化水平降低,分别是总Akt及Erk的(17.48±3.31)％与(11.55±3.27)％(P＜0.05)；转染前后的细胞暴露于不同浓度的顺铂作用48h,当顺铂浓度从10μmol/L增加到40μmol/L时,转染特异IGF-1R siRNA的细胞凋亡率从(22.21±4.63)％增加到(41.92±2.5)％(P＜0.05)；顺铂的IC50值从21.85μmol/L降到10.58μmol/L(P＜0.05),同时伴随着cleaved caspase-9的表达增强(P＜0.05).结论:沉默IGF1R的表达通过抑制下游信号通路的传导,增强子宫内膜癌对顺铂化疗敏感性.