缺氧缺血后脑水肿与水通道蛋白9表达及甘露醇作用相关机制研究

目的 探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemic brain damage,HIBD)后脑水肿与水通道蛋白(aquaporin,AQP)9的关系,以及甘露醇治疗脑水肿的机制.方法 选择健康7日龄SD大鼠108只,随机分为HIBD组、假手术组、甘露醇组各36只.HIBD组和甘露醇组制备缺血缺氧模型,甘露醇组在HIBD后0、24、48 h腹腔注射甘露醇,动物处死前均经腹腔注射2％伊文斯蓝2 ml/kg,各组在HIBD后0、6、12、24、48、72 h处死并检测脑组织含水量,逆转录聚合酶链反应和免疫荧光染色测定AQP 9表达变化,用伊文斯蓝作为血脑屏障通透性指示剂测定血脑屏障通透性.结果 HIBD组脑组织含水量从0h起高于假手术组(P＜0.05),随时间延长持续增加,48 h达顶峰(89.3％±1.9％),随后渐消退;甘露醇组脑组织含水量在应用甘露醇1h后开始下降,12 h达低谷(86.5％±0.6％),72 h上升(87.2％±1.7％),0～48 h均低于HIBD组(P＜0.05).HIBD组伊文斯蓝含量0h开始增加,48 h达峰值,各时间点均高于假手术组(P＜0.05);甘露醇组伊文斯蓝含量各时间点均低于HIBD组,除0h外,其余时间点差异均有统计学意义(P＜0.05).HIBD组AQP 9 mRNA在0h后下降,48 h达最低(0.09±0.07),0、6、72 h高于假手术组,12、24、48 h低于假手术组(P＜0.05);除48 h外,甘露醇组各个时间点AQP9 mRNA表达均高于HIBD组和假手术组(P＜0.05);免疫荧光染色显示AQP9广泛存在于软脑膜、室管膜等与水代谢密切相关的界面,缺血缺氧后早期AQP9表达增加,随后下降,晚期再增加.结论 AQP 9存在于脑组织各部位,通过多种途径参与脑水肿的形成和消退,在甘露醇减轻脑水肿中发挥作用.