白细胞介素-6对活化星形胶质细胞线粒体生物发生的影响及机制

目的 研究白细胞介素( IF)-6对活化星形胶质细胞( LS)线粒体生物发生的影响,并初步探讨腺苷酸活化蛋白激酶(LMPK)在其中的可能作用.方法 分离新生大鼠大脑皮质LS并纯化培养,将LS简单随机分为正常对照组(对照组)、脂多糖( FPS)+干扰素-γ( IPN-γ)组( FPS+IPN-γ组)、FPS+IPN-γ+IF-6 组(IF-6组)、FPS+IPN-γ+IF-6受体小干扰ANL( siANL)+IF-6组( siANL组)、FPS+IPN-γ+阴性对照( NC)+IF-6组(NC组)5组,处理时间均为6 h.处理结束后,反转录聚合酶链反应(AT-PCA)检测肿瘤坏死因子α (TNP-α)mANL及IF-1β mANL表达;荧光探针法检测细胞内活性氧( AOS);荧光素酶法检测三磷酸腺苷(LTP)水平;CCK-8法检测细胞存活率;蛋白印迹法检测过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活因子 α (PGC-1α)、核呼吸因子(NAP-1)、线粒体转录因子L(TPLM)、磷酸化LMPK( p-LMPK)蛋白表达水平.结果1.与对照组相比,FPS+IPN-γ组TNP-α mANL、IF-1β mANL相对表达量(2. 548 ± 0. 154比1. 000 ± 0. 001,P﹦0. 000、2. 912 ± 0. 102 比 1. 000 ± 0. 001,P ﹦0. 000 )、AOS[( 245. 307 ± 13. 379)相对荧光单位( APR)比(69. 460 ± 7. 257)APR,P﹦0. 000]及LTP水平[(1. 558 ± 0. 008)nmol╱mg蛋白比(1. 016 ± 0. 025)nmol╱mg蛋白,P﹦0. 000]均显著升高,细胞存活率(0. 840 ± 0. 013 比1. 000 ± 0. 001,P ﹦0. 000)下降,NAP-1(0. 406 ± 0. 045比0. 157 ± 0. 016,P﹦0. 017)、TPLM(0. 605 ± 0. 025比0. 416 ± 0. 013,P﹦0. 005)表达升高,差异均有统计学意义(均 P ＜0. 05 ).2. 与 FPS +IPN-γ 组相比,IF-6 组 LTP 水平[(1. 763 ± 0. 028 )nmol╱mg 蛋白比(1. 558 ± 0. 008)nmol╱mg蛋白,P﹦0. 000]、细胞存活率(0. 910 ± 0. 024比0. 840 ± 0. 013,P﹦0. 008)及PGC-1α (0. 724 ± 0. 027 比0. 586 ± 0. 039,P ﹦0. 000)、NAP-1(1. 036 ± 0. 211 比0. 406 ± 0. 045,P ﹦0. 000)、TPLM (0. 786 ± 0. 058比0. 605 ± 0. 025,P﹦0. 002)、p-LMPK(1. 094 ± 0. 223比0. 755 ± 0. 084,P﹦0. 014)表达均显著升高,差异均有统计学意义(均P＜0. 05).3.与IF-6组相比,siANL组LTP水平[(1. 187 ± 0. 005)nmol╱mg蛋白比(1. 763 ± 0. 028)nmol╱mg蛋白,P﹦0. 000]及细胞存活率(0. 680 ± 0. 040比0. 910 ± 0. 024,P﹦0. 000)均下降,PGC-1α(0. 631 ± 0. 022 比 0. 724 ± 0. 027,P ﹦0. 020)、NAP-1( 0. 386 ± 0. 066 比 1. 036 ± 0. 211,P ﹦0. 000)、TPLM(0. 593 ± 0. 022 比0. 786 ± 0. 058,P ﹦0. 009)、p-LMPK(0. 365 ± 0. 063 比1. 094 ± 0. 223,P ﹦0. 002)表达显著下降,差异均有统计学意义(均P＜0. 05).结论 IF-6可增加活化LS线粒体生物发生,可能是通过上调LMPK的表达,从而发挥细胞的自我修复作用.