枸橼酸咖啡因对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞增生与凋亡及长期学习能力的影响

目的：研究枸橼酸咖啡因(CC)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经细胞增生与凋亡及长期学习记忆能力的影响。方法7日龄SD新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组、CC组，每组16只；HIBD组及CC组经左颈总动脉结扎并缺氧制作HIBD模型，CC组在HI前、HI后0 min、24 h、48 h、72 h给予CC 20 mg/kg腹腔注射，假手术组和HIBD组分别在同一时间点给予等量生理盐水腹腔注射；同时从生后10日龄起腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记新生细胞，剂量50 mg/kg，每12 h 1次，共5次。12日龄时每组随机选取8只大鼠处死，免疫组织化学染色检测海马齿状回颗粒下层5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和海马CA1区活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(活化Caspase-3)的表达情况， TUNEL法测定海马CA1区神经细胞凋亡情况，其余各组大鼠28日龄时行Y迷宫学习和记忆能力测试。结果三组新生大鼠脑组织中均可见BrdU阳性细胞，差异有统计学意义(F=101.38，P<0.01)；HIBD组、CC组BrdU阳性细胞数均较假手术组增多，差异有统计学意义(P<0.05)。三组新生大鼠海马CA1区均可见活化 Caspase-3阳性细胞，差异有统计学意义(F=379.77，P<0.01)；CC组活化 Caspase-3阳性细胞较HIBD组显著减少，但仍多于假手术组，差异有统计学意义(P<0.05)。三组新生大鼠海马CA1区中均可见TUNEL阳性细胞，差异有统计学意义(F=505.92，P<0.01)，以HIBD组最多，假手术组最少，两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Y迷宫实验结果，各组大鼠达标所需训练总次数的差异有统计学意义(F=32.05，P<0.01)，以HIBD组所需训练次数最多。24 h后正确反应率在三组间的差异也有统计学意义(F=24.99，P<0.01)，以HIBD组大鼠正确反应率最低。结论枸橼酸咖啡因可以改善HIBD大鼠长期学习记忆力，其机制可能与通过减少缺氧缺血后神经细胞的凋亡有关。