尼曼-匹克病SMPD1基因突变分析

目的：探讨中国人尼曼-匹克病(NPD)家系发病的分子遗传学基础及SMPD1基因检测在中国人NPD家系基因诊断中的意义。方法收集3个无关的NPD家系的临床资料和血液标本，同时选取20例健康儿童的血液标本。从外周血提取基因组DNA，经聚合酶链反应(PCR)依次扩增3个家系中所有成员SMPD1基因的6个编码外显子及其侧翼内含子序列，扩增产物纯化后直接进行正反向测序，并与Genebank进行比对；将发现突变所在外显子的扩增产物通过TA克隆技术进一步证实突变的实际意义。结果家系1先证者为T107C的纯合突变，其父母均为T107C的杂合突变；家系2和家系3的所有成员均发现在SMPD1基因外显子1上有连续6个碱基缺失，即在编码序列第108碱基至第113碱基GCTGGC的缺失(c.108-113delGCTGGC)，且均为纯合突变。进一步应用TA克隆技术检测，家系2和家系3的所有成员随机挑选的单克隆测序结果均存在该突变c.108-113delGCTGGC。对20个正常对照的PCR扩增产物进行直接正反向测序，均未见以上突变。结论 SMPD1基因第1外显子上T107C的纯合突变为家系1先证者发病的分子遗传学基础，其父母是表型正常的基因突变携带者。家系2和家系3所有成员均发现在SMPD1基因第1外显子上存在c.108-113delGCTGGC的纯合突变，考虑为人类基因多态性。