SOX9基因沉默对膀胱癌EJ细胞株生物学特性的影响及其机制研究

目的 探讨SOX9基因沉默对膀胱癌EJ细胞株增殖、凋亡及迁移的影响及其潜在的作用机制.方法 采用SOX9 siRNA转染EJ细胞,抑制SOX9基因的表达,并以非特异性siRNA转染EJ细胞为对照.采用Edu细胞荧光染色法检测SOX9基因沉默对EJ细胞增殖的影响,Hoechst 33342细胞染色法检测SOX9基因沉默对EJ细胞凋亡的影响,划痕愈合实验检测SOX9基因沉默对EJ细胞迁移的影响,蛋白质免疫印迹(Western Blot)实验检测PTEN/AKT信号通路相关蛋白的表达水平.结果 对照组的SOX9 mRNA表达水平为(100.0±0.5)%,明显高于SOX9沉默组的(14.2±1.3)%,差异有统计学意义(P﹤0.01).转染72 h后,对照组细胞在450 nm激发光下的OD值为(4.0±0.3),明显高于SOX9沉默组的(2.3±0.2),差异有统计学意义(P﹤0.01).Edu细胞荧光染色结果显示,转染48 h后,对照组的细胞相对增殖率为(100.0±2.3)%,明显高于SOX9沉默组的(42.2±3.2)%,差异有统计学意义(P﹤0.01).Hoechst 33342免疫荧光染色结果表明,对照组的细胞凋亡率为(7.2±1.2)%,明显低于SOX9沉默组的(33.2±2.4)%,差异有统计学意义(P﹤0.01).划痕愈合实验表明,对照组的相对划痕愈合比例为(100.0± 1.9)%,明显高于SOX9沉默组的(56.6±4.3)%,差异有统计学意义(P﹤0.01).SOX9 siRNA转染EJ细胞1 h后,采用Western Blot检测PTEN、AKT及p-AKT蛋白的表达水平.结果显示,SOX9沉默组的PTEN蛋白表达水平高于对照组,p-AKT蛋白表达水平低于对照组.结论 沉默SOX9基因能够明显抑制膀胱癌EJ细胞株的增殖和迁移,并促进细胞凋亡,PTEN/AKT信号通路的激活可能与之有关.