RKIP在人乳腺癌组织及细胞中的表达及其通过NF-κB信号通路对乳腺癌细胞迁移和侵袭作用的研究

目的 探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在人乳腺癌组织及细胞中的表达及其通过核因子-κB(NF-κB)信号通路对乳腺癌细胞迁移和侵袭的作用.方法 收集良性乳腺肿瘤组织28例和恶性乳腺肿瘤组织35例,采用免疫组织化学法检测两种组织中RKIP的表达水平.将含有RKIP基因的cDNA插入GV141载体中构建RKIP质粒,作为RKIP过表达组的转染质粒;以空白GV141载体构建空白质粒,作为对照组的转染质粒.将上述两组质粒转染乳腺癌MDA-MB-435细胞,应用Transwell小室实验检测RKIP过表达组和对照组细胞的迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测RKIP蛋白的表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB mRNA的表达水平.结果 良性乳腺肿瘤组织中RKIP的表达水平较高,积分光密度(IOD)值为(0.527±0.057),高于恶性乳腺肿瘤组织的(0.217±0.048),差异有统计学意义(P﹤0.05).RKIP过表达组迁移细胞数目和侵袭细胞数目均明显少于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01).Western blot检测结果显示,RKIP过表达组的RKIP表达水平为(0.059±0.005),明显高于对照组的(0.009±0.002),差异有统计学意义(P﹤0.01).RT-PCR检测结果显示,RKIP过表达组中NF-κB mRNA的相对表达量为(0.120±0.016),明显低于对照组的(0.380±0.025),差异有统计学意义(P﹤0.01).结论 RKIP与乳腺癌的恶化程度有关,RKIP能够抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭,且其作用机制可能是通过对NF-κB的负调控而实现.