调控胎盘生长因子表达对骨肉瘤耐药逆转作用研究

目的 胎盘生长因子(placenta growth factor,PlGF)是一种属于血管内皮生成因子家族的分泌性同二聚体糖蛋白,对肿瘤等病理情况下的血管生成有重要作用,其在影响骨肉瘤耐药中的作用研究较少.本研究应用RNA干扰下调PlGF基因表达在逆转骨肉瘤耐药中的作用.方法 将骨肉瘤耐药MG-63细胞分为阴性对照组、空白对照组和转染组,转染组转染PlGF shRNA真核表达载体,空白对照组只添加空白转染剂,阴性转染组转染阴性对照RNA干扰试剂,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测转染前后PlGF基因和蛋白的表达变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,细胞计数盒8法检测各组细胞对化疗药物的敏感性.结果 PlGF shRNA可有效抑制MG-63骨肉瘤耐药细胞中PlGF基因和蛋白表达,PlGF基因下调71.3％(F=17.302,P=0.031),蛋白表达下调67.2％,F=27.112,P=0.023.转染组细胞凋亡高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义,F=22.34,P=0.037.3组细胞在加入多柔比星后增殖均具有不同程度的抑制,且呈明显的时间-效应关系,但转染组细胞的存活率均低于其他2组,差异有统计学意义,F=15.22,P=0.007.结论 应用RNA干扰技术下调耐药MG-63骨肉瘤细胞PlGF基因表达后,可有效促进耐药细胞的凋亡,从而增加其对化疗药物的敏感性,PlGF基因有可能成为骨肉瘤耐药治疗的新靶点.