转录因子FOXP4在食管胃结合部50例腺癌组织表达及对SGC-7901细胞生物学行为影响

目的 近年来,转录因子叉头框家族在肿瘤防治研究中越来越受到重视,但其在食管胃结合部腺癌(adenocarcinomas of the esophagogastric junction,AEG)中的研究相对较少.本研究旨在探讨转录因子叉头框蛋白P4(forkheadbox protein 4,FOXP4)在AEG组织和胃癌细胞系中的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法 选取2014-06-19-2016-12-21河北医科大学第四医院生物标本库采集的50例AEG手术患者的癌及癌旁组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测FOXP4的表达水平;同时应用qRT-PCR法检测胃癌细胞系(BGC-823、SGC-7901、MGC-803和HGC-27)中FOXP4的表达水平.选取FOXP4表达量最高的胃癌细胞系进行实验,将si-FOXP4转染细胞作为实验组,si-NC转染细胞和空白培养细胞作为对照组,细胞增殖实验(MTS法)、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测转染前后胃癌细胞生物学行为变化;流式细胞术检测转染前后细胞周期改变;qRT-PCR及蛋白印迹法检测转染前后上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA及蛋白的表达情况.计量资料2组样本比较采用独立样本t检验和近似t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析,多组内两两比较为SNK检验.结果 50例AEG组织中FOXP4表达量为1.917(0.976,2.908),高于癌旁正常组织的0.734(0.320,1.836),差异有统计学意义(Z=-2.093,P=0.036),并且FOXP4的表达水平与AEG患者临床分期(Z=-2.722,P=0.006)和淋巴结转移(Z=-2.744,P=0.006)有关.FOXP4在胃癌细胞系SGC-7901、MGC-803、BGC-823和HGC-27中的表达分别为5.183±0.870、2.615±0.308、4.696±0.792和2.059±0.569,与正常细胞对照1.055±0.444相比升高.与对照组相比,敲低FOXP4抑制胃癌细胞的增殖(F=114.848,P＜0.001)、侵袭(F=21.183,P＜0.001)和迁移(F=68.134,P＜0.001)能力.间充质细胞标志物N-cadherin(t=4.958,P=0.008)、Vimentin(t=9.555,P=0.001)、Twist(t=12.608,P＜0.001)和β-catenin(t=2.968,P=0.041)的mRNA及蛋白水平表达降低,E-cadherin的mRNA(t=5.420,P=0.006)及蛋白水平表达升高;G0/G1期细胞比例增加,S～G2/M期细胞比例降低,t=7.050,P=0.002.结论 FOXP4在AEG组织及胃癌细胞系中表达上调,异常表达的FOXP4与胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT相关.