宫颈腺癌与鳞癌组织基因甲基化测定

目的 宫颈癌变过程中包括表观基因与调控基因的改变,以DNA甲基化为代表的表观遗传改变可导致宫颈癌的发生.本研究通过分析基因甲基化在早期宫颈腺癌组织中的表达差异性,寻找预测宫颈腺癌发生发展的分子标志物.方法 收集新疆医科大学附属肿瘤医院2015-01-01-2017-06-30保存的新鲜初治原发宫颈腺癌组织15例和宫颈鳞状细胞癌组织15例,以及同期住院的正常宫颈组织15例,应用Illumina 850K甲基化芯片筛选宫颈腺癌组织的特异甲基化表达基因,亚硫酸盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)及实时定量RT-PCR(quantitative real time RT-PCR,Q-RT-PCR)方法对宫颈腺癌组织、宫颈鳞状细胞癌组织及正常宫颈组织进行验证.结果 芯片筛选结果显示,性别决定区Y框蛋白1(sex determining region Y-box1,SOX1)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1,CCND1)和蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PRKCA)等基因是宫颈腺癌组织中基因调控网络的中心节点.BSP检测结果显示,SOX1基因甲基化程度在宫颈腺癌为(0.975±0.013)％,宫颈鳞癌为(0.871±0.073)％,正常宫颈组织为(0.416±0.256)％,差异有统计学意义,F=18.640,P<0.001.SOX1是宫颈腺癌特异甲基化表达基因.CCND1(F=0.890,P=0.436)和PRKCA(F=1.749,P=0.693)不是宫颈腺癌特异甲基化表达基因,差异均无统计学意义.Q-RT-PCR检测结果发现,SOX1(t=3.213,P=0.009)、PRKCA(t=-3.448,P=0.006)在宫颈腺癌组与宫颈鳞癌组比较差异均有统计学意义.SOX1(t=2.190,P=0.043)、PRKCA(t=-2.561,P=0.028)在宫颈腺癌组与正常宫颈组比较差异均有统计学意义,CCND1在宫颈腺癌组与正常宫颈组(t=3.937,P=0.003)、宫颈鳞癌组与正常宫颈组(t=4.100,P=0.002)差异均有统计学意义.结论 抑癌基因SOX1是宫颈腺癌特异甲基化表达基因,有望成为宫颈腺癌诊断的特异标志物.CCND1、PRKCA基因不能证明是宫颈腺癌特异甲基化表达基因,考虑与BSP检测样本量少、检测位点少有关,有待于进一步研究.