恶性黑色素瘤细胞miR-21与PTPN14关系及其对迁移和侵袭影响

目的 miR-21在恶性黑色素瘤进展中扮演癌基因的角色,但具体机制不清.本研究旨在探讨miR-21和蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型14(tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 14,PTPN14)的关系及其在恶性黑色素瘤中的表达和作用机制.方法 通过RT-qPCR检测miR-21在恶性黑色素瘤细胞及正常黑色素细胞中的表达,转染miR-21 inhibitors沉默恶性黑色素瘤A375细胞miR-21的表达,RT-qPCR检测其沉默效果及对PTPN14 mRNA水平的影响;蛋白质印迹法检测其对PTPN14蛋白水平的影响;荧光素酶报告基因技术检测PTPN14是否为miR-21的直接靶基因;Transwell实验检测转染miR-21后A375细胞侵袭及迁移能力的变化.结果 与人表皮黑色素(human epidermal mela-noma,HEM)细胞相比,A375细胞中miR-21表达明显增高,t=2.732,P=0.029,转染miR-21 inhibitors的A375细胞中miR-21的表达明显下调,F=9.415,P=0.021;下调A375细胞中miR-21表达可以促进PTPN14的表达、抑制细胞的侵袭(F=6.585,P=0.032)及迁移(F=8.351,P=0.019)能力,miR-21 mimics可降低野生型PTPN143′-UTR的荧光素酶报告基因相对活性,t=3.42,P=0.035.结论 miR-21下调可以促进靶分子PTPN14的表达,阻滞恶性黑色素瘤细胞的侵袭及迁移.