环靶明对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞Hedgehog和Notch信号通路影响

目的 恶性肿瘤中Hedgehog信号通路和Notch信号通路间存在交互对话,但在乳腺癌中是否存在交互对话目前尚未明确.本研究探讨环靶明(Cyclopamine)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的Hedgehog信号通路抑制作用及对Notch信号通路影响.方法 培养MDA-MB-231细胞,分别用不同浓度环靶明(0、10、20和40 μmol/L)处理细胞48 h,用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞中Smo、Gli-1、Notch-1及Hes-1 mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中Smo、Gli-1、Notch 1及Hes 1蛋白表达.结果 环靶明处理MDA-MB-231细胞48h后,随着环靶明浓度增加,不同浓度组Smo蛋白和mRNA表达水平逐渐下降,Smo mRNA相对表达量分别为1±0.01、0.92±0.03、0.65±0.02和0.23±0.03,F=541.444,P＜0.001;Smo蛋白相对比值分别为1.67±0.02、0.73±0.03、0.54±0.05和0.31±0.04,差异有统计学意义,F=707.569,P＜0.001.不同浓度组Gli-1蛋白和mRNA表达水平逐渐下降,Gli-1 mRNA相对表达量分别为0.98±0.01、0.89±0.02、0.79±0.00和0.51±0.03,F=361.601,P＜0.001;Gli-1蛋白相对比值分别为1.14±0.13、0.92±0.02、0.66±0.07和0.37±0.05,差异有统计学意义,F=58.419,P＜0.001.但不同浓度组Notch-1 mRNA(F=1.328,P＞0.05)和Notch-1蛋白(F=1.830,P＞0.05)、Hes-1 mRNA(F=1.483,P＞0.05)和Hes-1蛋白(F=3.777,P＞0.05)表达水平改变差异均无统计学意义.结论 环靶明能明显抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞Hedgehog信号通路活性,且不影响Notch信号通路活性.