胆酸诱导肿瘤相关巨噬细胞促进肠腺瘤 癌变机制探讨

目的 持续暴露胆酸可诱导肠腺瘤癌变,机制尚不清楚,本研究旨在探讨肿瘤相关巨噬细胞表型转化在胆酸诱导小鼠肠腺瘤癌变中的作用.方法 20只4周龄APCmin/+小鼠随机分为对照组和胆酸组,每组10只.对照组常规饮食,胆酸组在常规饮食基础上添加0.4％胆酸.给药12周后处死,观察两组肠道肿瘤数目、大小及癌变率.HE染色评价肠道肿瘤病理类型,Ki-67免疫组织化学染色评价肿瘤细胞增殖水平.实时荧光定量PCR及免疫组织化学染色方法评价单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)的表达.实时荧光定量PCR检测肠道炎症因子、巨噬细胞表面分子F4/80、M1型巨噬细胞表面分子诱导性一氧化氮合酶(inductible nitric oxide synthase,iNOS)、趋化因子配体10(CXC chemokine ligand-10,CXCL-10)、M2型巨噬细胞表面分子甘露糖受体(mannose receptor,MR)、精氨酸1(argnine-1,Arg-1)和趋化因子配体17(chemokine ligand-17,CCL-17)的表达水平.运用免疫荧光双染方法检测肠道息肉组织中巨噬细胞表面分子F4/80、M1型及M2型巨噬细胞表面分子的表达.结果 胆酸组小鼠全肠道腺瘤总数(33.40±1.17)较对照组(22.80±0.93)明显增加,差异有统计学意义,t=7.11,P=0.002.胆酸组小鼠肠道肿瘤Ki-67阳性细胞百分比为(70.60±5.45)％,较对照组的(29.80±1.66)％明显增加,差异有统计学意义,t=7.17,P<0.001.胆酸可导致小鼠肠道低度炎症的产生,实时荧光定量PCR显示胆酸组小鼠肠道IL-1β相对表达量为14.14±2.78,较对照组的1.24±0.14明显增加,差异有统计学意义,t=4.62,P=0.0099.IL-6(3.40±0.11)和TNF-α(3.99±0.44)相对表达量明显高于对照组的1.45±0.29(t=7.32,P=0.0018)和1.42±0.24(t=5.07,P=0.0071).且胆酸组MCP-1的相对表达量(13.25±1.55)明显高于对照组(1.96±0.68),t=5.07,P=0.0026.免疫组织化学染色显示,胆酸组小鼠肠道组织间质MCP-1表达(86.67±2.03)高于对照组(43.99±4.73),t=8.49,P=0.0011.结论 胆酸可诱导肠道低度炎症上调MCP-1,促进肿瘤微环境中巨噬细胞表型由M1型向M2型转化,进而导致细胞增殖诱导肠腺瘤癌变.