BDNF基因表达水平对肝癌细胞97-H增殖和迁移影响机制探讨

目的 脑源性神经营养因子(brain-dervived neurotrophic factor,BDNF)促进肿瘤细胞的生长和转移,反义BD-NF(antisense BDNF)是BDNF基因的内源性反义长链非编码RNA,对BDNF表达水平具有调控作用.本研究旨在探讨BDNF AS对肝癌细胞97-H增殖和迁移的作用,以及对BDNF表达水平的影响.方法 采用BDNF AS质粒瞬时转染肝癌细胞系97-H,采用qPCR方法检测肝癌细胞中BDNF AS和BDNF mRNA水平,采用蛋白质印迹法检测BDNF蛋白表达水平,采用EdU掺入、划痕实验和Transwell小室研究转染BDNF AS对肝癌细胞增殖和迁移的影响.结果 转染BDNF AS质粒的细胞中,BDNF AS水平显著上调,是对照组细胞的(136.97±7.92)倍(F=880.301,P<0.001),而BDNF mRNA和蛋白水平显著降低,分别是对照组细胞的(0.50±0.08)倍和(0.275±0.050)倍,F=59.435,P<0.001;F=566.528,P<0.001.转染BDNF AS细胞的EdU阳性率为(36.1±2.3)％,显著低于对照组细胞(F=40.833,P<0·001),而过表达BDNF AS的细胞经rhBDNF刺激后,细胞增殖百分比增加,P=0.001.BDNF AS转染组细胞的划痕愈合率以及迁移细胞数分别为(6.23±0.30)％和31.0±2.6,均低于对照组细胞(F=25.975,P=0.001;F=15.851,P=0.001),而过表达BDNF AS的细胞经rhBDNF刺激后,迁移细胞数增加,P=0.002.结论 肝癌细胞97-H中BD-NF AS可能通过下调BDNF mRNA和蛋白水平,实现对肝癌细胞生长、迁移的负性调控作用.