RGD与细胞穿膜肽共修饰miRNA脂质体的构建及抗肿瘤研究

目的 制备RGD和细胞穿膜肽TAT共修饰载microRNA-34a脂质体(RGD/TAT-miLPs-34a),对其理化性质进行表征,研究脂质体与人骨肉瘤MG63细胞的亲和力和增殖抑制作用.方法 采用薄膜分散法制备RGD/TAT-miLPs-34a;定量细胞摄取实验研究MG63细胞对RGD/TAT-miLPs-34a的摄取效率以及对脂质体摄取的影响因素.定性共聚焦实验观察肿瘤细胞对脂质体的摄取.MTT实验研究RGD/TAT-miLPs-34a对MG63细胞的细胞毒性;构建骨肉瘤异位瘤模型,研究不同脂质体对肿瘤的生长抑制率.结果 MG63细胞在与脂质体共同孵育4h后,RGD/TAT-miLPs-34a组摄取效率为(185.3±17.5)％,TAT-miLPs-34a组为(67.5±8.6)％,RGD-miLPs-34a组为(82.7±9.5)％,miLPs-34a组为(40.9±7.8)％,差异有统计学意义,H=27.93,P＜0.001.RGD/TAT-miLPs-34a 4 h摄取效率是2h摄取效率(101.3±12.4)％的1.83倍,差异有统计学意义,z=5.58,P=0.001.骨肉瘤MG63细胞给药48 h后,RGD/TAT-miLPs-34a组MG63细胞存活率为(18.5±5.3)％,TAT-miLPs-34a组为(36.1±5.2)％、RGD-miIPs-34a组为(44.8±6.7)％,miLPs-34a组为(67.7±8.9)％,生理盐水组为(98.7±3.6)％,差异有统计学意义,H=19.271,P＜0.001.荷瘤裸鼠治疗实验miLPs-34a组对肿瘤生长的抑制率为(19.4±3.2)％,RGD-miLPs-34a组为(39.6±4.8)％,TAT-miLPs-34a组为(42.6±6.5)％,RGD/TAT-miLPs-34a组为(73.7±7.1)％,生理盐水组为0,差异有统计学意义,F=145.237,P＜0.001.结论 细胞穿膜肽与RGD共修饰载miRNA脂质体能够有效识别并穿透肿瘤细胞膜进入肿瘤细胞,是一种潜在高效的骨肉瘤靶向给药系统.