氯化锂对卵巢癌细胞增殖凋亡影响及其机制探讨

目的:观察氯化锂(lithium chloride,LiCl)对卵巢癌SKOV3细胞增殖活性及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:使用20(A组)、40(B组)和60(C组)mmol/L LiCl处理SKOV3细胞,正常对照组用等体积的细胞培养基培养.采用CCK8法观察LiCl对卵巢癌SKOV3细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测LiCl作用后细胞周期变化及凋亡情况.蛋白质印迹法检测细胞糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase3β,GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phos-phorglation-glycogen synthase kinase3β,p-GSK-3β)及有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient2,MAD2)蛋白表达的变化.结果:不同浓度LiCl分别作用于SKOV3细胞48 h后,A组细胞增殖活性为(80.64±1.06)％,与B组(57.18±1.56)％比较,差异有统计学意义,P=0.001;与C组(43.18±6.12)％比较,差异有统计学意义,P＜0.001.B组作用24 h细胞增殖活性为(75.12士9.35)％,48 h为(57.18±1.56)％,72 h为(35.36±1.00)％,与24 h组相比,48 h组(P=0.158)和72 h组(P=0.036)细胞增殖活性降低.LiCl能有效抑制SKOV3细胞增殖,呈时间与剂量依赖性.不同浓度LiCl作用96 h后SKOV3细胞的凋亡率相对于对照组升高,A组为(7.82±0.87)％,P=0.037;B组为(21.09±1.57)％,P＜0.001;C组为(27.83±0.47)％,P＜0.001,差异均有统计学意义.不同浓度LiCl作用48 h后,细胞出现了明显的G2/M期阻滞,G2/M期的比例由对照组的(10.23±1.50)％依次升高,A组为(19.9士4.16)％,P=0.352;B组为(30.29±0.51)％,P=0.045;C组为(39.32±1.11)％,P=0.009,差异有统计学意义.蛋白质印迹法检测结果显示,LiCl浓度升高,p-GSK-3β蛋白相对表达量升高,A组为(54.39±2.75)％,P=0.019;B组为(72.39±2.89)％,P=0.009;C组为(86.57士2.52)％,P=0.005,差异有统计学意义.LiCl浓度升高,MAD2蛋白相对表达量升高,A组为(52.29±1.34)％,P=0.041;B组为(58.35±1.36)％,P=0.030;C组为(72.07±2.93)％,P=0.006,差异有统计学意义.结论:LiCl能有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,并诱导其凋亡;上调MAD2增强有丝分裂检测点功能,最终导致细胞G2/M期阻滞可能是LiCl抑制增殖促进凋亡的机制.