PMA诱导K562细胞向单核细胞分化机制探讨

目的:探讨佛波酯(phorbol-12-myristate-13-ace-tate,PMA)诱导K562细胞向单核/巨噬细胞分化的作用机制.方法:采用CCK8法检测0、6.25、12.5、25、50、100和200 nmol/L PMA对K562细胞增殖的影响,应用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化,采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达变化,采用RT-PCR分析TGF-β1及其下游基因SMAD3和SMAD4在基因水平的表达趋势,并采用蛋白质印迹法检测TGF-β1在蛋白水平的表达变化.结果:K562细胞经6.25 nmol/L PMA处理后72 h增殖抑制率为(22.03±2.7)％,12.5 nmol/L为(31.04±4.3)％,25 nmol/L为(35.03±3.5)％,50 nmol/L为(47.01±4.1)％,100 nmol/L为(55.06±5.2)％,200 nmol/L为(76.72±5.4)％,差异有统计学意义,F=2.24,P＜0.05.PMA能抑制K562细胞的增殖并能促进其分化,作用效果随剂量的加大逐渐增强;细胞形态学上趋向于成熟分化;细胞表面分子CD11b和CD14的表达量升高.在mRNA水平,TGF-β/SMAD信号通路因子TGF-β1的表达量随时间的延长逐渐升高其下游因子SMAD3和SMAD4的表达也呈上升趋势;在蛋白水平,TGF-β1的表达亦呈上升趋势.结论:PMA可通过促进TGF-β/SMAD信号的传导诱导白血病细胞株K562细胞向单核/巨噬细胞分化.