长链非编码RNA AGAP2-AS1通过YAP通路影响结肠癌细胞的生物学行为
Chinese Journal of Clinical Oncology(2020)
Abstract
目的:探究AGAP2-AS1在结肠癌组织中的表达及对结肠癌恶性生物学行为和Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)信号通路的影响.方法:通过TCGA数据库分析457例结肠癌和42例健康样本的AGAP2-AS1表达水平.收集于2018年1月至2019年3月在义乌市中心医院就诊且通过病理科确诊的结肠癌组织和癌旁组织20例,通过实时荧光定量PCR检测其AGAP2-AS1的表达,之后进一步检测SW480、HCT-116和NCM460细胞中的AGAP2-AS1表达.利用CCK-8试剂盒、克隆形成、细胞划痕和流式细胞实验分析其细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的改变.Western blot检测YAP、p-YAP以及基质金属蛋白酶(matrix metallo-peptidase,MMP)2、MMP9的表达.免疫荧光检测YAP在细胞内的定位情况.共转染pcDNA3.1-AGAP2-AS1和si-YAP质粒,然后检测YAP、p-YAP、MMP2、MMP9蛋白的表达.结果:TCGA数据库显示AGAP2-AS1在结肠癌组织显著高表达,并且AGAP2-AS1在结肠癌组织样本和细胞中表达也显著增加.敲低/过表达AGAP2-AS1后HCT-116细胞迁移,增殖能力显著降低/增加,凋亡显著增加/抑制;同时敲低AGAP2-AS1后会诱导YAP磷酸化,减少YAP入核调控,且MMP2、MMP9的表达也显著降低(P<0.05).共转染结果显示AGAP2-AS1通过激活YAP通路上调MMP2、MMP9表达(P<0.05).结论:AGAP2-AS1在结肠癌组织和细胞系中均高表达,且诱导结肠癌细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡.此外,AGAP2-AS1通过激活YAP通路调控MMP2、MMP9的表达影响结肠癌侵袭和转移.
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