冬凌草甲素对结肠癌LOVO细胞增殖和EMT影响的实验研究

目的 探讨冬凌草甲素(oridonin,ORI)对结肠癌细胞株LOVO细胞增殖和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及可能的机制.方法 不同药物浓度(0、2、4、8、12和16 μg/mL)冬凌草甲素处理结肠癌LOVO细胞,不同时间点(24、48和72 h)采用CCK-8法观察细胞增殖情况,RT-PCR检测E-cadherin和Vimentin mRNA表达水平,Western blot检测磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phospharylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)、β-catenin、E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平.结果 冬凌草甲素对LOVO细胞增殖抑制率呈时间和剂量依赖性(均P＜0.05).4、8和12 μg/mL冬凌草甲素作用48 h,增加LOVO细胞E-cadherin基因表达量,减少Vimentin的基因表达量(均P＜0.05),也增加LOVO细胞p-GSK-3β(Tyr216)蛋白表达量,减少p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达量,同时下调β-catenin蛋白表达量(均P＜0.05).GSK-3β特定的抑制剂CHIR 2μmol/L作用1h后,再加入12 μg/mL冬凌草甲素共同作用24h,能逆转冬凌草甲素对β-catenin、E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响(均P＜0.05).结论 冬凌草甲素可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌LOVO细胞的生长增殖和EMT过程.