新型荧光靶向前哨淋巴结示踪剂的验证研究
China Oncology(2020)
Abstract
背景与目的:示踪剂是前哨淋巴结活检的关键,传统荧光示踪剂无法靶向前哨淋巴结且荧光强度弱.探寻一种近红外荧光强度更大、穿透力更好的新型增强近红外荧光示踪剂聚甲川菁染料分子Cy754,并将其与利妥昔单抗(rituximab,Rit)结合形成新型近红外荧光靶向示踪剂Cy754-Rit.方法:化学合成新型增强近红外荧光示踪剂Cy754,检测其相对分子质量、激发光谱、吸收光谱等,将其与Rit进行直接偶联.测定Cy754-Rit标记率,检测新型示踪剂中单抗分子完整性和免疫活性.采用近红外成像仪将Cy754-Rit与吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)-Rit的荧光强度作比较,检测其安全限度,通过前哨淋巴结动物模型验证其前哨淋巴结的定位特性,并与Cy754、ICG-Rit、核素进行对比.结果:Cy754的相对分子质量为818,激发波长为740 nm,发射波长为760 nm.直接偶联并纯化的Cy754-Rit保持了分子完整性和免疫活性.Rit上的Cy754标记率为100%.Cy754-Rit的荧光强度优于ICG-Rit(3.08×1010 vs 6.56×108).透析纯化后的新型增强靶向示踪剂中未检测到细菌和热原.实验动物局部注射,观察2周后,局部及全身无红肿也无皮疹,无死亡.Rit与Cy754偶联的最佳的物质的量比为1∶80.Cy754-Rit能够准确地定位前哨淋巴结,其定位特性与核素相似,但发射荧光穿透力优于ICG-Rit(14.3 mm vs 13.2 mm).结论:Cy754-Rit的制备工艺简便、高效、无放射性,其荧光强度较传统荧光靶向示踪剂明显增强.经动物模型局部注射能够准确地定位到前哨淋巴结,显像清晰稳定,穿透力好,但仍需临床试验进行相关验证.
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