EphA7在骨肉瘤中的表达及对骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和凋亡的影响

背景与目的:EphA7蛋白是对人体正常生理过程具有重要作用的一种膜蛋白,常在细胞膜中发挥多种调控作用,但该蛋白在骨肉瘤中的作用尚不清楚.该研究拟观察骨肉瘤组织中EphA7的表达,并了解EphA7对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法:收集45例患者的骨肉瘤组织和瘤旁正常组织.培养人骨肉瘤MG-63细胞,用siRNA转染MG-63细胞,并分成siRNA-EphA7组(EphA7-siRNA转染)、siRNA-Control组(阴性对照siRNA转染)和空白组(未转染).采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)评估组织和细胞中EphA7的mRNA表达和蛋白水平.通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)测定细胞增殖活力,通过细胞划痕实验检测细胞迁移能力,利用流式细胞术检测细胞凋亡.结果:RTFQ-PCR和Western blot检测结果显示,EphA7的mRNA表达和蛋白水平在骨肉瘤组织中明显高于瘤旁正常组织(P＜0.05);与空白组和siRNA-Control组相比,siRNA-EphA7组中EphA7的mRNA表达和蛋白水平显著降低(P＜0.05).CCK-8测定结果显示,siRNA-EphA7组的吸光度(D)值显著低于空白组和siRNA-Control组(P＜0.05).细胞划痕实验显示,与空白组和siRNA-Control组相比,siRNA-EphA7组在划痕后愈合率显著降低(P＜0.05).流式细胞术显示,与空白组和siRNA-Control组相比,siRNA-EphA7组凋亡率显著增加(P＜0.05).结论:EphA7在骨肉瘤组织中表达上调.下调MG-63细胞中EphA7的表达可抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移,促进其凋亡.