5'-脱氧氟尿苷联合干扰素对转染TP基因结肠癌细胞株裸鼠实验模型的影响

背景与目的:人结直肠癌细胞基本无胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)表达.本实验主要探讨人结肠癌细胞株LS174T转染TP基因后,在裸鼠肿瘤组织中对抗癌药物5'-脱氧氟尿苷(5'-deoxy-5-fluorouridine,5'-DFUR)、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和干扰素-α2a(interferon-α2a,INF-α2a)干预效果的影响.方法:以慢病毒为载体转染TP基因至结肠癌细胞株LS174T,得到稳定传代的高TP表达株.将96只BALB/c裸鼠分成2组,分别应用野生型及转染TP基因后的LS174T细胞株接种裸鼠背部皮下,制成结肠癌TP低、高表达模型.每组再随机分为6组,分别应用0.9％NaCl溶液、INF-α2a、5-FU、5-FU+INF-α2a、5'-DFUR和5'-DFUR+INF-α2a干预5 d,2周后处死裸鼠,分离肿瘤称重后,分别应用鼠抗人CD34、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和抗PD-ECGF单克隆抗体进行免疫组织化学染色.判定是否有TP表达及对微血管进行计数.结果:在野生型LS174T裸鼠荷瘤模型中,使用抗肿瘤药物的3～6组肿瘤质量与对照组相比均明显降低,抑癌率分别为48％、27％、48％和57％,差异有统计学意义(P<0.05).其中5'-DFUR组(48％)与5'-DFUR+INF-α2a组(57％)、5-FU+INF-α2a组与5'-DFUR+INF-α2a组(27％与57％)相比,抑癌率差异有统计学意义(P<0.05).在LS174T-TP细胞株裸鼠模型中,5'-DFUR组和5'-DFUR+INF-α2a组抑癌率分别为27％和48％,而使用5-FU的两组未显示出良好的抗肿瘤效果(7％和3％).免疫组织化学染色显示,野生型LS174T接种形成的肿瘤组织中TP表达阴性,微血管数目较少,而转染TP基因后,肿瘤组织中TP表达明显上升,微血管密度明显增多(P<0.05).结论:结肠癌细胞株LS174T转染TP基因后,在裸鼠实验肿瘤模型中,TP表达明显增加,使细胞内激活抗癌药物5'-DFUR的抗癌作用明显增强,联合应用INF-α2a能进一步增强这种抗癌作用.而转染TP基因或联合应用INF-α2a对常规抗癌药物5-FU的抗癌效果无明显影响.