HOXC6、 HOXC8基因对食管鳞癌细胞凋亡的影响及在接受手术切除食管鳞癌患者中的临床意义

[目的]通过靶向敲低HOXC6和HOXC8基因,研究HOXC6和HOXC8表达对食管鳞癌细胞增殖水平、克隆形成能力、细胞周期分布及细胞凋亡等生物学特性的影响,探讨HOXC6和HOXC8对食管鳞癌细胞凋亡的调控以及HOXC6和HOXC8表达在手术切除的食管鳞癌患者中的临床意义.[方法]收集145例接受手术切除的食管鳞癌患者的癌组织标本进行HOXC6和HOXC8表达免疫组化检测,并和患者的总生存期(overall survival,OS)进行相关性分析.细胞实验中,构建敲低HOXC6和HOXC8的慢病毒表达载体(pGLV3-shHOXC6和pGLV3-shHOXC8),转染食管鳞癌细胞株ECA109,分别采用Real-time PCR和Western blot方法检测HOXC6和HOXC8基因的敲低效率.分别采用CCK8法和软琼脂克隆形成实验检测敲低HOXC6和HOXC8基因表达后对ECA 109细胞增殖的影响.采用流式细胞仪检测敲低HOXC6和HOXC8基因表达后对ECA109细胞周期分布及细胞凋亡的影响.[结果]HOXC6和HOXC8高表达和低表达患者的预后具有显著差异.HOXC6高表达和低表达患者的中位OS分别为38.5和81.3个月,差异具有显著的统计学意义(P=0.001).HOXC8高表达和低表达患者的中位OS分别为34.6和114.4个月,差异同样具有显著的统计学意义(P＜0.001).另外,细胞实验表明:转染shRNA可显著下调ECA109细胞中HOXC6和HOXC8 mRNA和蛋白表达水平.CCK8结果显示干扰组(HOXC6shRNA或HOXC8shRNA)的细胞生存率较对照组明显下降(P＜0.05);克隆形成实验显示干扰组细胞克隆形成能力较对照组明显降低;流式细胞仪检测结果显示干扰组出现明显的G1细胞周期阻滞,且干扰组细胞凋亡率明显高于对照组.[结论] HOXC6和HOXC8高表达对食管鳞癌患者预后有不良影响.敲低HOXC6和HOXC8基因可促进食管鳞癌细胞株ECA109凋亡.靶向调控HOXC6和HOXC8可能抑制食管鳞癌的发生与发展.