可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体与5-Fu联用对肝癌细胞的抑制作用

[目的]探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体ILZ-sTRAIL与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)联合应用,对HepG2肝癌细胞生长的抑制作用.[方法]采用聚合酶链反应(PCR)、酶切、连接等方法构建CMV启动子驱动TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的载体pLentiR.ILZ-sTRAIL及其对照载体pLentiR.CopGFP,经测序验证其正确性.将pLentiR.ILZ-sTRAIL和pLentiR.CopGFP分别转染至293T细胞,48h后收集上清并利用ELISA检测目的蛋白含量.利用CCK8细胞增殖抑制实验、Western blot检测ILZ-sTRAIL与5-Fu联用对HepG2肝癌细胞生长的抑制作用及凋亡蛋白的表达变化.[结果]成功构建表达载体pLentiR.ILZ-sTRAIL及pLentiR.CopGFP,测序正确.ILZ-sTRAIL的表达量达(9.475±0.786)ng/ml.体外ILZ-sTRAIL与5-Fu联用,可协同抑制HepG2肝癌细胞的生长.其中凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低,Bax表达增加,Caspase-8、9、3及PARP被剪切活化.[结论]ILZ-sTRAIL蛋白与5-Fu联合应用对肝癌细胞HepG2具有抑制作用,为肝癌的治疗提供了一种新策略.