抗癌胚抗原单克隆抗体的制备和初步应用

[目的]生产抗癌胚抗原(CEA)的单克隆抗体(McAb),制备检测血清CEA含量的酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒.[方法]用亲和层析法纯化的CEA抗原免疫BALB/C小鼠,经细胞融合挑选出两株适用于CEA ELISA试剂盒的McAbs进行重点鉴定.用ELISA法测定亲和力常数和免疫球蛋白亚类,用中和抑制法和免疫印迹电泳法鉴定特异性.[结果]两株McAbs均为鼠IgG1亚类,其亲和力常数分别为1.03×10-9M和2.25×10-9M,只有CEA阳性血清能抑制McAbs与包被CEA的反应,免疫印迹电泳显示两株McAbs只与200kDa的CEA形成一条带,所组成的试剂盒与放射免疫分析试剂盒比较,其灵敏度为96.60%,特异性为99.11%,总符合率为98.52%.[结论]两株McAbs具有较好的特异性和亲和力,用该两株McAbs组成的ELISA试剂盒可以应用于临床检测CEA.