miR-145调控肝癌腹水模型Th9细胞升高的机制研究

目的:探讨miR-145调控肝癌腹水模型Th9细胞升高的作用机制.方法:构建小鼠H22肝癌腹水模型.造模两周后处死小鼠并分离出脾脏组织,流式细胞术分析肝癌腹水组(MA组)与正常对照组(Control组)小鼠脾脏Th9细胞表达水平.ELISA法检测脾脏IL-9表达水平.RT-PCR法检测脾脏miR-145表达水平.Western Blot法检测脾脏中PI3K/Akt/mTOR/P70S6K/HIF-1α相关蛋白表达水平.分选小鼠脾脏CD4+T细胞,随机分为miR-145 mimics组和NC组,分别应用miR-145-5P mimics、阴性对照寡核苷酸(negative control,NC)进行转染,RT-PCR检测各组miR-145、HIF-1αmRNA及IL-9 mRNA表达水平.结果:与Control组相比,MA组Th9细胞及其细胞因子IL-9表达均升高(P<0.05),miR-145表达降低(P<0.05),p-PI3K、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p-P70S6K、HIF-1α蛋白均升高(P<0.05).与NC组相比,miR-145 mimics组miR-145显著升高,HIF-1αmRNA及IL-9 mRNA表达下降.结论:肝癌腹水中Th9细胞升高可能与miR-145下降导致的PI3K/Akt/mTOR/P70S6K/HIF-1α通路激活有关.