miRNA-125b靶向p16促进套细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭的机制探讨
Journal of Modern Oncology(2020)
摘要
目的:探讨miRNA-125b抑制靶基因p16对套细胞淋巴瘤细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:选择人源套细胞淋巴瘤细胞系JeKo-1作为实验对象.实验共分为五组:空白对照组(不转染)、miRNA-125b阴性对照组(转染 miRNA -125b inhibitor-NC)、miRNA -125b 抑制剂组(转染 miRNA -125b inhibitor)、p16siRNA阴性对照组(转染p16siRNA-NC)、p16siRNA组(转染p16siRNA).于转染后48h收集细胞.采用RT-PCR法检测各组JeKo-1细胞miRNA-125b的表达水平;采用双荧光素酶靶标实验验证miRNA-125b与p16基因的靶向关系;采用Western Blot和RT-PCR法检测各组细胞p16基因的表达水平;采用MTS法检测各组细胞增殖水平;采用流式细胞术检测各组细胞周期分布;采用Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能 力.结果:与空白对照组、miRNA-125b inhibitor-NC组相比,miRNA-125b inhibitor组 miRNA-125b表达水平显著降低,而p16表达水平显著升高,细胞增殖受到抑制、JeKo-1细胞穿膜细胞数显著减少,细胞G0/G1期比例显著增加,而S期比例逐渐减少(P<0.05);与p16siRNA-NC组相比,p16siRNA组p16表达水平明显被抑制,细胞增殖能力及细胞侵袭能力均显著升高,细胞G0/G1期比例显著降低,而S期、G2/M期比例升高,差异均具有统计学意义(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-125b与p16基因3'UTR端存在互补结合位点,miRNA-125b和p16能够靶向结合,p16基因是miRNA-125b的靶基因.结论:miRNA-125b能够通过抑制靶基因p16促进套细胞淋巴瘤细胞的增殖和侵袭能力,可通过抑制miRNA-125b,促进p16基因的表达,使套细胞淋巴瘤细胞阻滞于G0/G1期,抑制其增殖转化.
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